斑马鱼心脏功能的测量
斑马鱼(斑马鱼)日益成为医学研究中的重要工具,在广泛的人类心血管疾病的研究中具有重要的应用。它的小体积和相应的小空间需求、相对快速的性成熟(约3个月)、每周产生数百个胚胎和体外受精使其日益成为可用于研究的动物之一。小动物科研超声。
斑马鱼的心脏功能可以使用临床前超声成像。斑马鱼心脏由4个腔室组成——静脉窦、心房、心室和动脉球。通过在池水中注射MS222可以诱导成鱼的轻度麻醉。然后,鱼可以被操纵,放在它们的背侧,用橡皮泥轻轻地在它们的身体周围手工塑模,轻轻地约束它们。高达55 MHz的传感器可用于在长轴和短轴视图中对心脏进行成像。小动物科研超声。从成年斑马鱼获得ECG信号是具有挑战性的,因此心脏收缩和心脏舒张的时间是根据心室大小和成年人心率范围从120到180次/分钟的频谱多普勒迹线来确定的。此外,成年斑马鱼体内血液的回声类似于周围的组织结构使得腔室容积的区分具有挑战性。
斑马鱼胚胎心脏功能的测定
使用超声波评估胚胎斑马鱼的心脏功能也是可能的,尽管胚胎的光学透明性意味着心脏功能也可以使用包括视频边缘检测技术在内的光学显微镜技术来研究。使用多普勒超声技术,可以对心脏功能进行快速评估,斑马鱼胚胎的心率取决于温度,但在28℃时约为200 bpm。在扫描之前,使用MS222在培养皿中麻醉胚胎,然后包埋在琼脂糖中。小动物科研超声。一旦琼脂凝固,新鲜的水族箱水被加入到培养皿中以限制麻醉的影响。然后可以识别出单个的胚胎鱼,并用立体显微镜记录它们心脏的方向。然后将培养皿放置在加热板上,温度保持在28.5℃,同时用放置在胚胎附近的热电偶进行扫描以监测温度。然后将超声换能器降低到水中,然后可以扫描单个胚胎。