斑马鱼胚胎心脏功能的超声测定
发布时间:2022-05-20 17:16:06

  斑马鱼胚胎心脏功能的超声测定

  

  使用超声波评估胚胎斑马鱼的心脏功能也是可能的,尽管胚胎的光学透明性意味着心脏功能也可以使用包括视频边缘检测技术在内的光学显微镜技术来研究。使用多普勒超声技术,可以对心脏功能进行快速评估,斑马鱼胚胎的心率取决于温度,但在28℃时约为200 bpm 。

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  在扫描之前,使用MS222在培养皿中麻醉胚胎,然后包埋在琼脂糖中。一旦琼脂凝固,新鲜的水族箱水被加入到培养皿中以限制麻醉的影响。然后可以识别出单个的胚胎鱼,并用立体显微镜记录它们心脏的方向。

  

  然后将培养皿放置在加热板上,温度保持在28.5℃,同时用放置在胚胎附近的热电偶进行扫描以监测温度。然后将超声换能器降低到水中,然后可以扫描单个胚胎。

  

  悬浮在琼脂中的受精后5天斑马鱼胚胎的b型图像。胚胎以55兆赫成像。

  

  临床前超声—肾脏应用

  

  可以在小鼠处于仰卧或俯卧位置时扫描小鼠的肾脏。可以先用电推剪脱毛,再用脱毛膏脱毛。除非使用造影剂,否则对肾脏成像不需要高时间分辨率,因此可以在肾脏的深度上选择多个焦点位置。根据动物的大小,使用的频率往往在30到40 MHz之间。

  

  b模式成像用于定位肾脏,与中央髓质相比,肾脏的皮质趋向于具有增加的反向散射(更亮)。成年啮齿动物的双肾都可以扫描。

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  一个小鼠肾脏的图像和一个双功能图像,在将频谱多普勒样本体积放入血管之前,使用彩色多普勒定位血管和流向。可以测量肾血流并计算肾动脉阻力指数(收缩期峰值速度-舒张末期速度)/收缩期峰值速度)及其表示血管床中血流阻力的值。

  

  (一)肾脏的b型图像。注意图像上的两个焦点位置。(二)小鼠肾脏的双重图像。在双功能图像中,使用彩色多普勒盒作为指示器来定位样本体积,以显示血管的位置和血流方向。

  

  也可以使用超声造影剂来研究肾脏的血管分布。当使用造影剂时,以俯卧姿势扫描小鼠,避免了当以仰卧姿势扫描小鼠肾脏时可能发生的由肠道阴影引起的潜在成像伪影。使用注射泵通过尾静脉快速注射或输注造影剂。

  

  50μl micro marker(Bracco Research SpA,Geneva,Switzerland)在5秒内以1:5的稀释度注射是典型的给药方案。对于采集,基线图像是在注射造影剂之前立即以特定于造影剂的成像模式采集的,并且被保存为单独的数据集,或者在造影图像序列上放置时间标记,指示何时注射造影剂,并且在该时间标记之前拍摄的图像被认为是基线图像。

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  一种替代方法是注射造影剂,然后使用短的低频高压声脉冲破坏2D平面内的造影剂。然后恢复低压对比特定成像序列,紧接在这些高压脉冲之后的初始帧被视为基线图像,随后的帧显示对比增强。在注射造影剂之后,获得了长序列的2D图像,序列的长度可以由用户预先设定。一旦保存了序列,可以使用内部软件或制造商开发的特定对比软件来绘制感兴趣区域(例如髓质、皮质)内的反向散射信号的强度,以研究灌注动力学。

  

  感兴趣的度量包括曲线下面积、峰值增强时间、吸入率,这些可以用作血容量和血管密度的指标[20].在许多情况下,如果正在研究缺血再灌注损伤(IRI)小鼠模型,一个肾脏可以作为对照,然后可以从两个肾脏获得B模式和对比增强数据。